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血液蛋白制品临床应用 试纸临床应用

血液蛋白制品临床应用问题解答

1、 如何评价血液蛋白制品的质量标准?

答:作为直接静脉注射用的血液制品,产品质量无疑是最重要的。评价一个蛋白制剂的质量,需要从以下四个方面来考量:

首先是蛋白质的含量(浓度)。从理论上来讲,蛋白质的含量越高越好,浓度越高说明单位体积所含蛋白的量就越多,临床应用治疗效果也就越明显。但在蛋白制品的研发过程中,在确定临床应用的最终浓度时还要考虑动物的正常生理含量。所以,并不是蛋白质浓度越高就越好,蛋白浓度越高还容易造成聚合体生成增多,聚合体含量过高会产生副作用,从而影响制品的疗效。

其次是蛋白质的纯度。纯度高说明蛋白制品中有效蛋白质的含量多,杂蛋白含量少,临床治疗效果才会显著。纯度不仅与制剂的疗效有关,还与安全性有关。如果制剂中蛋白质纯度不高,杂蛋白含量高,动物注射过多的杂蛋白质会诱发机体产生变态反应,从而导致免疫系统异常。

第三是蛋白质的生物活性。只有蛋白质保持正常的生物活性,才能发挥临床治疗作用。这主要取决于以下两个方面:蛋白分子结构保持完整性,如果发生降解,作用就会大大降低,甚至失去活性;蛋白分子保持独立型,如果蛋白质分子形成蛋白聚合体,也会大大降低其有效性,甚至会影响到安全性。因此,既要保证蛋白分子结构的完整性,又要控制聚合体的生成,是保证蛋白制品安全有效的重要措施。

第四是生物安全性。作为直接接静脉注射用的血液蛋白制品,必须确保对动物不会造成危害,包括不能携带外源活的病原微生物,生产环节不能有细菌污染,产品内毒素要达到静脉注射标准,动物使用后没有副反应等。

2、博莱得利公司是如何控制蛋白产品质量的?

答:由于公司拥有国内最好的的生产技术、生产设施、质控技术和十多年的生产经验,完全按照人医血液蛋白产品的生产工艺和质量标准来生产和检验,产品质量达到国内的最高标准。

蛋白质浓度(含量):采用经典的凯氏定氮法测定的犬血白蛋白含量为100mg/ml,犬血免疫球蛋白含量为30mg/ml;

蛋白质纯度:采用醋酸纤维素薄膜电泳法测定蛋白纯度不低于96%;

蛋白质生物活性:采用分子排阻色谱法测定蛋白分子单体含量高于95%,多聚体含量不高于5%;

生物安全性:原材料检测不携带外源活病毒;生产各环节细菌检测无细菌生长;内毒素达到注射标准要求,小于8IU;动物试验证明没有副反应。

3、蛋白浓度是如何测定的?

答:蛋白浓度是评价蛋白质量的参数之一,浓度测定是由经典的凯氏定氮法测定,人用血液白蛋白也是用这个方法测定。有些宠物医院会生化分析仪来检测白蛋白的浓度,但与凯氏定氮法的测定不具有直接相关性。

4、静脉注射犬血蛋白的优点和使用注意事项?

答;静脉注射用犬血蛋白与其他剂型相比的优点:显效快,直接输入血液循环中,避免肌肉注射时酶解的损耗,使蛋白成份得到充分利用;能反复大剂量输注,有利于控制疾病的发展;免去肌内注射的疼痛感;避免口服途径中机体各种蛋白酶对其结构完整性的破坏。

犬血蛋白是最有效的血液生物制品,使用越早临床治疗效果越好。选择蛋白浓度高、纯度好、抗体活性高的产品,输注后在动物体内存留的时间长,效果好。输注剂量要足够,输注剂量以每千克体重输给蛋白毫升数为依据(2mL/kg),若剂量不足,将影响疗效。蛋白与其他药品联合使用,比单独使用效果佳。如细菌感染时,免疫球蛋白与抗生素联合使用,能很快控制感染。

5、犬血蛋白的使用剂量和使用疗程周期有无限制?

答:由于犬血蛋白是犬自身的同源蛋白质,不会产生排斥反应,可连续按照推荐剂量使用。

6、静脉注射犬血免疫球蛋白只能在传染病例中使用吗?

答:不是。博莱得利犬血免疫球蛋白从健康犬血液中提取,其含有犬体内所有免疫球蛋白的亚类和生物学结构,在病毒细菌、真菌、寄生虫等感染病例中发挥重要的作用。人医临床上,普通免疫球蛋白主要用于提高患者体内免疫球蛋白水平,达到防病治病的目的。

7、在犬瘟热和犬细小病毒感染治疗过程中,使用特异性免疫球蛋白还需要再使用单抗、血清等生物制品吗?

答:不需要。博莱得利公司特异性免疫球蛋白中和抗体效价均达到最高水平,可以有效治疗犬细小病毒和犬瘟热病毒感染。通过静脉滴注,可直接进入患犬血液中,迅速提高体内中和抗体水平,中和病毒,大大提高治愈率,治疗效果大大好于单抗、血清等生物制品。

8、特异性免疫球蛋白在什么时间使用效果明显?

答:尽早应用,治疗时间越早,效果越好。特异性免疫球蛋白和病毒直接结合,将病毒消灭,减少血液循环中的病毒数量,也可以阻止病毒在组织细胞内繁殖,减轻病毒对机体组织的破坏,有利于治疗后的恢复。

9、过敏会出现什么临床症状?该如何紧急解救?

答:由于犬的体质不同,任何药品都有过敏的可能性。文献报道,生物制品的过敏率为0.1%左右。严重过敏体质者慎用,注射后,如出现过敏,立即注射脱敏药物,可选择皮下注射0.1%肾上腺素(0.5-1.5ml),肌肉注射地塞米松(0.1-0.5mg/kg,1次/4-8h),肌肉注射强力解毒敏2ml,如果过敏反应严重时,可以输液,一般推荐选择5%葡萄糖+25%葡萄糖+维生素C,缓慢滴注。

犬过敏临床上表现的一般症状:①出现过敏症状的时间均在1-30分钟左右;②皮肤过敏型:皮肤发生红斑,嘴唇、下腹皮下水肿,眼结膜、口腔粘膜潮红发炎;③血清反应型:荨麻疹、淋巴结水肿、犬伸舌张嘴喘;④呼吸系统型:喉头、支气管粘膜水肿、痉挛性咳嗽、呼吸困难,可视粘膜发绀、窒息死亡;⑤循环系统型:心跳亢进,眼结膜苍白;⑥神经系统型:昏迷、晕倒、大小便失禁;⑦消化系统型:上吐、下泻腹痛,里急后重。

试纸临床应用问题及解答

1、瑞必诊试纸黑色T线有什么技术优势?

答:瑞必诊试纸是全世界唯一拥有黑色条带专利技术,可以保证检测更加准确,剔除假阳性和假阴性。同时,也具有一定的防伪作用。

2、瑞必诊产品的质量是如何确定的?

答:瑞必诊试纸是经国家权威检测部门—中国农科院哈尔滨兽医研究所农业部实验动物质量监督检验测试中心应用Real-time PCR 和经典PCR 等检测方法对瑞必诊公司的犬瘟热病毒和犬细小病毒抗原快速诊断试纸等产品进行检验测试,其产品的敏感性和特异性均达到行业内最好水平。

3、检测抗原与检测抗体的有什么区别?

答:检测抗体阳性只能表示动物曾经感染过病原或曾经使用疫苗免疫过,线条颜色深浅可反映治疗过程中抗体的变化,或疫苗免疫后的抗体保护效价。当有合适的仪器能定量分析颜色值时,则可类似ELISA试剂一样,相应定量地检测出抗体效价;检测抗原阳性则能直接确诊动物病原的存在,临床治疗中,也可对抗原进行持续间歇检测来观察使用药物对病原的影响。当然,刚注射弱毒疫苗后不久的动物,用试纸进行检测,结果可能呈阳性,但疫苗与野毒在T线颜色强度上存在差异。

4、如何提高犬瘟热病毒试纸的检出率?

答:犬瘟热临床分为四型:呼吸道型、神经型、胃肠道型、混合型。犬瘟热感染早期,分泌物中病毒含量较少,且犬瘟热病毒在空气中容易失活,采拭样本存在人为误差,单检分泌物容易漏检。 建议采用口、鼻、眼多点多次采样充分混匀;对于胃肠道型的犬瘟容易被忽视,可以采集犬粪便或肛门腺分泌物为取样样本;犬瘟热感染前期血液中已有病毒繁殖,采血分离血清,进行检测得到的结果更加准确。如果不具备采用离心方法收集血清的条件,也可直接采1-2滴全血加到已采集分泌物的稀释液中,混匀后即可取上清液进行检测。

5、为什么有时候T线出现慢?

答:若犬、猫发病处于潜伏期时,排泄的病毒量可能较少,相应采样溶液中的病毒浓度偏低。在反应开始的3-5分钟,T线可能呈现较淡,到10分钟反应结束后,线条会呈现地相对清晰。

6、为什么有时候会出现 “回流”现象?

答:试纸反应完并判定为阴性结果的,再放置一定时间后,T线处呈现出较模糊线条。这是因为当试纸样品液往吸水纸端的流速会逐步减慢,当溶液被吸水纸全部吸纳后,会出现缓慢的溶液回流。胶体金颗粒因此会出现物理性的非特异吸附或滞留,出现模糊的线,形成假阳性现象。这是胶体金回流造成的假象,该检测结果无效。

7、为什么有时候会出现“T”线消失现象?

答:主要是样品中病毒浓度过高,样品稀释后再测,效果就好了。病毒浓度过高时,胶体金上的抗体只能结合部分病毒并形成黑色复合物。当复合物流经T线时,其中的病毒被固定在T线的抗体结合捕获,逐渐形成黑色线条。溶液中未被结合的游离病毒则与复合物中的病毒竞争T线的抗体结合位点,从而挤走黑色复合物。因此黑色线会逐渐变浅,甚至消失。

8、为什么有时候会出现“白板”现象?

答:导致原因有:滴加样品溶液时速度过快,溶液量过多(一般超过了5滴),使溶液从观察窗的膜表面漫涌着流过去,反应失败。样品溶液中盐分浓度偏高或pH值偏酸偏碱,也会导致胶体金抗体受影响,不能顺利反应。如果试纸保存条件不当,使纸条上的抗体失效,也无法进行反应。

9、为什么有时会发生T、C线颜色深浅差异?

答:当检测样品中含有要检测的病原达到或超过试纸的最低检测限时,T线开始呈现出红色线条,其颜色的深浅,直接发映原含量的高低。C线颜色则与病毒含量无关,只是T线免疫反应的一个参照。当C线出现时,无论颜色深浅,仅表示该试纸上抗体没有失活,反应有效。当C线不出现时,表示试纸受到了破坏,该反应无效。